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尿沉渣检查

日期:2010-06-04 13:45:21 来源:中华检验医学网 点击:

 一、尿沉渣检查的内容
  正常人尿中可有很少量红细胞,白细胞,上皮细胞,结晶,粘液丝,罕见有透明管型。
  但如果有过多的血细胞和异常上皮细胞和管型,以及细菌,滴虫,肿瘤细胞和病毒包涵体,那就提示有肾脏及泌尿系统的疾病或损伤。
  其中,管型可根据横径大小分为(1)狭窄型(为1-2个红细胞直径大小),(2)中等宽度型(3-4个红细胞直径大小),(3)宽型(5个红细胞直径大小)。宽型管型提示肾实质有严重损害。

二、尿沉渣检查的指征
1、美国临床检验标准委员会(NCCLS)规定凡有下述情况的应进行显微镜检查:
  (1)医生提出镜检要求的,
  (2)检验科规定的患者(如泌尿科,肾病科,糖尿病,应用免疫抑制剂及妊娠妇女),
  (3)任何一项利理学,化学检验结果异常的。
2、我国检验学会规定凡红细胞,白细胞,蛋白和亚硝酸盐四项干化学检查中有其中任何一项不正常者都应进行显微镜检查,并以显微镜检查报告为准。
那也就是说,只有干化学法检测尿液红细胞,白细胞,蛋白和亚硝酸盐四项检查均阴性(正常)时,检验人员可不做显微镜检查(复查)。

三、尿沉渣检查的方法
(一)非染色尿沉渣镜检
操作
1、取刻度离心管,倒入混合后的新鲜尿液10ml,500r/min离心5min。
2、待离心停止后,取出离心管,弃去上层清液,留下0.2ml沉渣,轻摇离心管, 使尿沉渣有形成分充分混匀。
3、取尿沉渣0.02ml,滴在载玻片上,用18mm′18mm的盖玻片覆盖。
结果判断
尿沉渣镜检观察,用10′10镜头,观察其中有形成分的全貌及管型。用10′40镜头观察鉴定细胞成分和计数,应观察10个视野所见最低和最高值,记录结果。管型用高倍镜鉴定,但计数按低倍镜观察20个视野,算出一个视野的平均值,记录结果。
参考值
1、细胞成分:每高倍镜视野所见的最低值至最高值:
       红细胞0-3/HP,白细胞0-5/HP。
2、管形(透明):每低倍镜视野平均值0-1/全片
3、尿结晶和盐类数量以每一高倍视野+,2+,3+,4+报告
(二)、染色尿沉渣镜检
Sternheimer-Malbin(SM)染色液的配制:
溶液I:结晶紫3.0g95%乙醇20.0ml草酸铵0.8g蒸馏水80.0ml
溶液II:沙黄0.25g95%乙醇40.0ml蒸馏水40.0ml
将意识哪个两种溶液分别置冰箱保存。配制应用染色时,取3份溶液I接97份溶液II,混合过滤,储存于棕色瓶中,室温下可保存3个月。
操作
在0.2ml沉渣中加入1滴染色液,混合,覆盖盖薄片,3min后镜检。
结果判断
红细胞染成淡紫色。多形核白细胞的核染成橙红色,浆内可见颗粒。透明管型染成粉红色或淡紫色。细胞管型染成深紫色。

(三)、尿沉渣定量检查
(1)、过筛法
操作
1、留病人新鲜晨尿,混合后直接滴入血细胞计数池内。
2、计数5个大方格中的红细胞,白细胞,上皮细胞及管型数,结果′2即得出每ml 内的数。
参考值
正常人每ml新鲜尿中红细胞,白细胞,小圆上皮细胞为0-2/ml 超过2-5/ml为可疑,10/ml为阳性。
(2)、一小时尿沉渣计数
操作
1、标本收集:
  患者先排尿弃去,准确收集3h尿液于清洁干燥容器内送检(标本留取时间为5:30-8:30)。
2、准确测量3h尿量,充分混合。取混匀尿液10ml,置刻度离心管中,1500r/min,离心5min,用吸管吸弃上层清液9ml,留下1ml,充分混匀。吸取混匀尿液1滴,注于血细胞计数板内。细胞共数10个大方格,管型计数20个大方格。

计算
                 1000        3小时尿总量ml数
1小时细胞数=10个大方格细胞总数×----------× ---------------------------
                  10          3
         20个大方格管型总数      1000      3小时尿总量ml数
1小时管型数= ----------------------------- × --------- × ---------------------------
           2              10          3

式中: 1000为 换算成ml数,10为尿液浓缩倍数。
参考值
红细胞:男性 <3万/h,女性< 4万/h。
白细胞:男性 <7万/h,女性 <14万/h,
管型: < 3400/h。

四、尿沉渣定量分析板的使用
器材
  1、尿沉渣离心管:带有刻度,可放10ml尿液,管底有一个"凸凸头"。当倾倒离心后的上清尿液时,"凸凸头"里的尿沉渣不会流出,大约容量为ml。
  2、尿沉渣定量分析板:每块分析板上有10个均一厚度(0.1mm)计数池,每个计数池内有固定体积(1ml)的计数区(计数区内划分10个中方格,每个中方格又划分为9个小方格),
操作
  1、取均匀混合尿10ml于离心管中,1500r/min,离心5min,倒去上清尿液。
  2、取1小滴(15-20ml)尿沉渣冲入定量分析板其中一个计数池中,然后用低倍镜观察,高倍镜计数,计数在1ml计数区内红细胞,白细胞,上皮细胞和各类管型的数量。

也有国家采用不离心的混合尿,冲入计数池内进行计数。

  表1 尿沉渣显微镜检查规范操作比较
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  项 目        NCCLS          JCCLS          中国
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  标本要求   推荐晨尿,放置时间   推荐放置时间不超过2h。   推荐晨尿,放置时间
         不超过2h。 不超过1h。
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  标本量    10ml,12ml,15ml         10ml          10ml
---------------------------------------------------------------------------------------
  离心管    透明的塑料或玻璃的   透明的塑料或玻璃的带    带刻度的离心管
         带刻度,有盖,尖底   10ml,0.2ml刻度的尖
         的一次性试管      底试管
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  离心机要求  带自动锁盖的恒温水   水平式离心机
         平式离心机
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  离心时间     5min          5min             5min
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  离心力    400g(其中半径是指   500g(其中半径是指离      1500r/min
         离心机中轴至离心管   心机中轴至离心管底部
         底部的距离)      的距离)
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  留取沉渣量  依照厂商的产品而定     0.2ml             0.2ml
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  检查量    依照厂商的产品而定     15ml              15ml
---------------------------------------------------------------------------------------
  载玻片和盖  依照厂商的产品而定    75mm×26mm           18mm×18mm
  玻片要求                18mm×18mm
---------------------------------------------------------------------------------------
  显微镜要求  普通光学显微镜      普通光学显微镜        普通光学显微镜
---------------------------------------------------------------------------------------
  镜检观察    推荐采用湿片法    推荐采用湿片法,观察视野   推荐采用湿片法,细胞
  要求                 数目20-30个,不少于10个    成分观察视野数目为20
                                   个高倍视野,管型为10
                                   个低倍镜视野
---------------------------------------------------------------------------------------
  染色要求    推荐活体染色       不必采用染色
---------------------------------------------------------------------------------------
  结果报告方式  推荐采用每ml尿      以视野均值报告      细胞成分以每高倍视野
          有形成分数量来                   最低至最高值范围报告,
                                   表示 管型以每低倍视野均值
                                   报告
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表2 各种尿沉渣成分的主要临床意义
------------------------------------------------------------------------------
  尿沉渣成分              主要临床意义
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  红细胞        月经,过度运动,各种肾,泌尿系统疾病,如外伤,炎症
             结石,结核,肿瘤,各种原发或继发急性和慢性肾小球肾
             炎或肾病
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  白细胞        泌尿系统感染(包括上泌尿道和下泌尿道),各种肾损害
            (包括免疫性炎症和移植肾排斥反应)
------------------------------------------------------------------------------
  上皮细胞
   肾小管上皮细胞   肾实质及肾小管损害(如药物中毒)
   磷状上皮细胞    正常人或污染
------------------------------------------------------------------------------
  管型
   宽型        严重肾实质损害
   肾上皮细胞     肾小管退化,变性
   颗粒或蜡样     肾实质损害
   透明        酸性尿--含高盐,多为病理性
------------------------------------------------------------------------------
  细菌         泌尿系统感染
------------------------------------------------------------------------------
  脂肪体(卵圆小体)  肾病综合症
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表3 四种常见尿沉渣检查法CV%值比较
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  方 法               白细胞      红细胞
----------------------------------------------------------------------------
  普通载玻片不加玻片法        15.0       17.0
  载玻片加盖玻片法          12.0       15.0
  改良Neubauer计数池法        10.2       9.9
  Fast-Read-10R定量板法        9.3       7.0
---------------------------------------------------------------------------




           血尿的鉴别诊断

一,血尿的概念

1, 以传统的尿离心沉渣玻片镜检,在高倍镜(40′,即放大400倍)下检查10个视野后,如每高倍视野中见到红细胞超过3-5个,则定为镜下血尿。
2,但是不同作者对正常尿液中红细胞数量的观察不完全一致,如
  (1) 以高倍镜下红细胞数表达者有:
     0-2/Hp, 3-5/Hp, 1-8/Hp。
  (2) 以12h尿红细胞数表达者有:
     Addis(1926年)< 425000/12h,
     其他作者 < 600000/12h(相当 2/Hp或5000/ml尿)。
  (3) 以24h尿红细胞数表达者有:
     < 1.2′106/24h尿, < 1.2′106/24h尿。
  (4) 以每ml尿中红细胞数表达者有:
     < 8000/ml(8/ml <5000/ml 500-5000/ml <14000/ml
 
二,尿中红细胞形态
1,肾性血尿--红细胞有形态改变--至少有两种以上红细胞形态
  (1) 大小改变,(2)形态异常,(3)红细胞内血红蛋白分布及含量变化。
见表4。
2,非肾性血尿--红细胞大小形态一致--以单一正常形态红细胞为主

三,尿中异形红细胞形成的机制
1,红细胞通过有病理改变的肾小球滤膜,受到积压损伤。
2,红细胞受到不同pH和渗透压持续变化的肾小管滤液的影响。
  (1) 碱性尿(pH>9.0),红细胞膜脂质外层面积增加,出现锯齿形和棘形红细胞。
  (2)酸性尿(pH<4.0),红细胞膜脂质内层面积增加,出现可逆口形或细胞肿胀,溶解。
  (3)渗透压较低(如400mOsm)出现面包圈样,戒形红细胞。
  (4)渗透压偏高(如900 mOsm)且pH增高时,则形成锯齿形,棘形红细胞。

四,鉴别尿液中红细胞形态的方法:
1,普通显微镜
非染色法,由于缺乏色泽对比和立体感,不易鉴别。
染色法(甲基绿染色,结晶紫-沙黄染色,瑞氏染色),可增加形态鉴别特征。
2,相差显微镜
红细胞立体感强,易于鉴别。
3,血液分析仪
可通过测定红细胞的MCV和RDW进行鉴别。肾性血尿以小红细胞为主,MCV小于血中红细胞的MCV。非肾性血尿以大红细胞为主,MCV大于血中红细胞的MCV。肾性血尿RDW增大,非肾性血尿RDW正常。
4,尿液有形成分分析仪
如日本Sysmex UF-100,可将尿液中成分作荧光染色后识别,如肾性血尿,红细胞散射光分布在图象左侧,而非肾性血尿,红细胞散射光分布在图象右侧。
5,扫描电镜
检测敏感,但价格昂贵,难于普及。

以上方法中以相差显微镜检查为首选。

表4 尿液各种红细胞形态的分类定义
---------------------------------------------------------------------------------------------
  红细胞       形态简图       形态描述         临床意义
---------------------------------------------------------------------------------------------
  圆盘形                 中央双凹圆盘状      非肾小球来源,
                                  见于出血,外伤
                                  感染,肿瘤,结
                                  石,结核等。
---------------------------------------------------------------------------------------------
      异形红细胞>75%为肾性血尿,<20%为非肾性血尿
  棘形                  环样红细胞膜,      肾小球来源,见于
                      有向膜外或膜内      肾小球肾炎
                      数量不等,大小      正常人和非肾性血
                      不一囊状突起       尿 <2%,而肾性血
                                  尿>75%
  锯齿形                 红细胞表面有短
  (皱缩形)               的突起,但大小高
                      低,但大小高低基
                      本一致,均匀分布
  环形                  细胞,膜呈致密双
  (面包圈形)              圈形平坦状


  影形                  细胞膜极薄,整个
                      细胞呈淡影状(胞
                      内血红蛋白丢失)

  口形                  单一凹陷呈碗状


  靶形                  目靶状或铃状

  裂形                  半圆盘状,带有2-3
                      个尖端突起,呈极小
                      不规则碎片

(责任编辑:labweb)

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